玖玖精品在线观看-玖玖国产精品-玖玖福利-玖玖爱这里只有精品-2021国产精品久久-2021国产成人综合亚洲精品

電話咨詢:
010-50973130
技術文章
當前位置:首頁 > 技術文章 > 內毒素清除劑 使用說明

內毒素清除劑 使用說明

更新時間:2010-10-24  |  點擊率:6180

 

內毒素清除劑
 

目錄號
包裝
價格
產地
 
50ml
Solarbio
 
100ml
Solarbio

 
產品簡介:
本公司生產的內毒素清除劑主要用于清除DNA、蛋白質或其他液體樣品中的內毒素。在特定的pH值、鹽濃度和溫度條件下,內毒素清除劑能與DNA、重組蛋白以及液體樣品中的內毒素特異性結合,經過室溫高速離心后,DNA或蛋白質等保留在水相,而內毒素則被濃縮到極小體積的下層相而被清除。經過3次以上重復抽提后可將活性為500050000 EU/ml的內毒素水平降低到50.5 EU/ml以下,即降低100010000倍。本試劑4℃可儲存半年,-20℃長期儲存。
 
操作步驟:
提取前請將內毒素清除劑放在冰上冰浴5min,期間翻轉瓶子數次使試劑均勻預冷。
1a)已純化的質粒DNA內毒素清除:吸取500μl DNA溶液于微型離心管,加入1/10體積3M NaAc pH5.21/20體積5M NaCl溶液,冰浴5min
   b)在提取質粒DNA過程中清除內毒素:以堿裂解法提取質粒為例,在加入裂解液和中和液并離心去除碎片之后,吸取含質粒DNA的上清于新離心管中,冰浴5min
2、加入1/5體積預冷的內毒素清除劑,振蕩混勻,溶液變渾濁。
3、冰浴5min,溶液應變清亮。
437℃水浴5min,不時振蕩,溶液又變渾濁。
512000rpm室溫離心5min,溶液應分為兩相,上層水相含DNA,下層油狀相含內毒素。
6、將含DNA的上層水相轉移到新管,棄油狀相,重復抽提三次,即重復步驟2-6三次。
7、加入2.5體積無水乙醇,-20℃沉淀30min或過夜;12000rpm離心10min,棄上清;70%乙醇洗滌沉淀,12000rpm離心5min棄上清;空氣干燥沉淀,加入100200μl無內毒素的高純水或TE溶解沉淀。
8、用內毒素檢測試劑測定樣品中內毒素活性,并與初始樣品比較。
  
注意事項:
1DNA濃度>1mg/ml時清除內毒素效率降低。由于DNA和蛋白質本身的性質,清除程序可導致10-20DNA丟失,所幸的是與清除內毒素的艱難相比DNA更容易提取制備。
2、所有溶液應用無內毒素的高純水配制,所有器械材料均應不含內毒素,玻璃器皿可高溫烘烤,非揮發性水溶液可高壓120℃高溫處理。
 
內毒素簡介:
內毒素(endotoxin)原稱熱原,是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜及其它微生物細胞壁的主要組成成分,其化學本質為脂多糖,主要由O-特異性鏈、核心多糖和類脂A三部分組成。脂多糖共價連接到非極性的疏水性類脂A(Lipid A)形成帶負電荷的大分子,同時還具有一個親水性的寡糖核,因而具有疏水和親水雙重性質。制備質粒DNA和重組蛋白時,細菌破壁之后將釋放大量脂多糖。無論是普通制備純化程序,還是離子交換、凝膠排阻過濾,甚至是氯化銫超速離心等制備程序,脂多糖任不可避免地與DNA或蛋白質牢固結合而被共同純化。脂多糖具有強烈的免疫活性和細胞毒性,并能產生多種復雜的細胞生物學效應,大多數情況下會明顯干擾并產生不可預測的實驗結果。例如在DNA轉染實驗中,內毒素競爭性干擾轉染試劑與DNA的結合,顯著降低轉染效率,并產生明顯細胞毒性降低外源基因表達水平。




主站蜘蛛池模板: 久久国产一级毛片一区二区| 亚洲小视频在线| 精品一区二区三区亚洲| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁88| 亚洲欧美精品在线| 一本大道香蕉视频在线观看| 一级a毛片免费观看久久精品| 国产在线视频专区| 欧美在线一区二区三区不卡| 国产产一区二区三区久久毛片国语| 久久精品国产999久久久| 日日天天| 欧美成人一区二区三区在线视频| 苦瓜影院1313理论片| 亚洲欧美v| 亚洲欧美经典| 日韩 亚洲 制服 欧美 综合| 国产a精品| 不卡一级aaa全黄毛片| 成人无码一区二区片| 97精品国产91久久久久久| 一本色道久久88综合亚洲精品高清| 欧美精品福利| 国产精品视频一区二区三区| 国产 日韩 欧美视频二区| 国产精品久久久久9999| 国产精品大全国产精品| 九九九国产在线| 国产精品va一区二区三区| 成人在线一区二区三区| 国产精品免费_区二区三区观看| 人善交xxx| 亚洲欧美一区二区三区孕妇| 精品国产欧美一区二区三区成人| 色女人在线| 青青草国产在线视频| 免费看成人国产一区二区三区| 久久精品一区二区| a色毛片免费视频| 91精品推荐| 国产亚洲欧美另类一区二区三区|